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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】胶回收后没有条带
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zwlr116812

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】胶回收后没有条带 已有9人参与

请教各位，我双酶切载体后，胶回收目标条带，可是后来检测却没有结果，这可能是什么原因造成的
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1楼 2011-03-09 14:51:56
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1 you did not cut the right band
2 the column for purification is not efficient for the plasmid purifiy
3 you used less amount of elution solution to elute your plasmid
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有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
2楼2011-03-09 15:40:38
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
用的什么试剂盒啊？
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3楼2011-03-09 15:41:53
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gppwfh

金虫 (正式写手)
胶回收一般都不会出错，除非是你的目的条带太太弱，或者操作过程出错。
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4楼2011-03-09 16:18:03
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
回收之后我一般都不跑胶了，因为试过几次，纯化后跑胶没条带，但是连接转化又能得到阳性克隆
真是不可思议的实验
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你的日子如何，你的力量也必如何！
5楼2011-03-09 16:23:36
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zwlr116812

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by gppwfh at 2011-03-09 16:18:03:
胶回收一般都不会出错，除非是你的目的条带太太弱，或者操作过程出错。

目标条带在切胶的时候看得很清楚，而且确定酶切错，回收步骤也没遗漏什么，前几次用的效果还是很好的
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6楼2011-03-09 17:10:52
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是否试剂盒过期
还是胶回收跑胶是点样没点上
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
7楼2011-03-09 17:39:52
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
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1：酶切后应该先跑电泳看看有没有条带？然后再纯化；
2：有可能没有切开；
3：纯化的过程出现问题，纯化后加ddH2O过多。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
8楼2011-03-09 18:35:59
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0610616

木虫 (正式写手)
★
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我用TAKARA的试剂盒回收的  效果都很好 那你可以试一下
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Everythingisok!
9楼2011-03-09 19:21:11
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0610616

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wangleisdnu at 2011-03-09 15:40:38:
1 you did not cut the right band
2 the column for purification is not efficient for the plasmid purifiy
3 you used less amount of elution solution to elute your plasmid

GG很厉害呀
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Everythingisok!
10楼2011-03-09 19:22:07
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