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各位大神,求助:PCR产物纯化后没有条带了……
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樊樊
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[
求助
]
各位大神,求助:PCR产物纯化后没有条带了……
已有3人参与
目的DNApcr扩增出来条带在1500bp左右,条带明亮单一,符合我的实验要求。p了50微升体系,把产物用全式金纯化试剂盒纯化之后就没有条带了,这是怎么回事啊?第一次失败怀疑是体系浓度太小,所以第二次p了两管平行,同时p的,条带都很正常,纯化依旧没有条带,这是为什么。
各位大神帮帮我。
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1楼
2014-04-05 10:32:47
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樊樊
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3楼
:
Originally posted by
西门吹雪170
at 2014-04-05 10:57:03
1、可能你过柱子的时候没把水加到正中间
2、你检测时的上样量太小,本来回收后浓度就很低的
1 是说往柱子里面加样的时候,要悬空滴在柱子中间? 这个确实没有注意到…… 汗一个
2 上样量大概多少合适?我只上了三微升,是不是太少了?3微升是因为p好的产物孔里只加这么少
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5楼
2014-04-05 12:32:32
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2014-04-05 11:04:57
樊樊: 金币+3,
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有帮助
2014-04-05 12:34:08
应该是浓度低 你可以浓缩下 或者下次洗的时候少加点水 洗
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相信什么才会得到什么
2楼
2014-04-05 10:43:30
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西门吹雪170
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★ ★ ★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流
2014-04-05 11:05:02
樊樊: 金币+2,
★★★
很有帮助
2014-04-05 12:34:30
1、可能你过柱子的时候没把水加到正中间
2、你检测时的上样量太小,本来回收后浓度就很低的
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植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
3楼
2014-04-05 10:57:03
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d00614028
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2014-04-05 14:44:04
从两个方面考虑吧:
1. 挂柱没挂上。
2. 洗脱没洗下。
洗脱的话看看洗脱液的PH值是否正确,看看说明书。
实在不行自己配置试剂来纯化把,3M CH3COONa,你在网上搜搜方法。
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4楼
2014-04-05 11:16:12
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