24小时热门版块排行榜    

查看: 2040  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 求助:酶切的疑惑 已有3人参与

最近做酶切,老是切不好,求帮助。
(1)回收不到东西:图1是回收之前的带。图2是回收之后的带,已经弥散。


(2)做转化鉴定,发现原来质粒未酶切完全。但是回收后的条带有稍微的弥散,这是什么原因?如图3.

(3)图4中圆圈指示的区域是什么?是弥散的还是。。。。??

望解答。急求。

求助:酶切的疑惑
图1


求助:酶切的疑惑-1
图2


求助:酶切的疑惑-2
图3


求助:酶切的疑惑-3
图4
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-07 15:42:56
可能问题出在回收环节
...

回收按步骤来的,最后没有好结果 ,好桑心。
9楼2014-04-08 15:41:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
鬼羽帝魂: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-05 10:20:12
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-05 10:57:51
鬼羽帝魂: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-08 21:45:41
1. 回收不到东西: 看看你的TAE的pH值是否正确,我们实验室曾经有一次TAE 的PH值不正确导致回收不了DNA。另外你胶回收的洗脱液用的是什么,是水么?洗脱液的PH好像要在8左右,保持碱性,要不然洗脱不下来。
2. 未酶切完全,回收回来的可能就有质粒,你那弥散可能就是质粒。
3. 你圈的东西是不是因为跑胶的问题导致的呢,看你胶配的不是很好,另外,给个建议,不要用这么大的孔来跑,我觉得这样会导致弥散严重,建议用正常的胶回收孔来跑(个人建议)。
  希望对你有帮助。
2楼2014-04-05 10:01:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-05 10:01:41
1. 回收不到东西: 看看你的TAE的pH值是否正确,我们实验室曾经有一次TAE 的PH值不正确导致回收不了DNA。另外你胶回收的洗脱液用的是什么,是水么?洗脱液的PH好像要在8左右,保持碱性,要不然洗脱不下来。
2. 未酶 ...

谢谢。        我是用试剂盒里的Eluent洗脱的。   回收的质粒弥散是不是降解了?
3楼2014-04-05 10:19:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-04-05 10:19:57
谢谢。        我是用试剂盒里的Eluent洗脱的。   回收的质粒弥散是不是降解了?...

你这回收的是质粒还是酶切产物啊,我晕了,要是质粒的话质粒形态差不多就是那样的,酶切产物的话  你不是说你的质粒未完全酶切开么,混有了质粒大概就是那样了,  DNA做个酶切胶回收还不至于降解的。
4楼2014-04-05 10:56:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见