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鬼羽帝魂木虫 (著名写手)
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求助：酶切的疑惑 已有3人参与
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最近做酶切，老是切不好，求帮助。 （1）回收不到东西：图1是回收之前的带。图2是回收之后的带，已经弥散。 （2）做转化鉴定，发现原来质粒未酶切完全。但是回收后的条带有稍微的弥散，这是什么原因？如图3. （3）图4中圆圈指示的区域是什么？是弥散的还是。。。。？？ 望解答。急求。  图1  图2  图3  图4 |
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鬼羽帝魂
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3楼2014-04-05 10:19:57
d00614028
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1. 回收不到东西： 看看你的TAE的pH值是否正确，我们实验室曾经有一次TAE 的PH值不正确导致回收不了DNA。另外你胶回收的洗脱液用的是什么，是水么？洗脱液的PH好像要在8左右，保持碱性，要不然洗脱不下来。 2. 未酶切完全，回收回来的可能就有质粒，你那弥散可能就是质粒。 3. 你圈的东西是不是因为跑胶的问题导致的呢，看你胶配的不是很好，另外，给个建议，不要用这么大的孔来跑，我觉得这样会导致弥散严重，建议用正常的胶回收孔来跑（个人建议）。 希望对你有帮助。 |
2楼2014-04-05 10:01:41
d00614028
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