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忆满城风絮

金虫 (小有名气)

[求助] RnaseA会影响PCR结果么? 已有2人参与

RT,在提取DNA电泳后发现明显拖带就用RNA酶处理了下再跑,果然好多了。RNA酶没有处理掉就接着做,酶切DNA,再连接上接头,电泳显示还是不错的,但是PCR出来之后就说嘛都没有了,已经2次了,都是什么都没有。
所以我想问下各位,是不是在PCR变性和退火过程中那95度的高温让RNA酶把单链DNA给降解了?
师兄说是接头的问题,没有连好,但是不可能2次都是这样啊。。。
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欲得其中,必求其上;欲得其上,必求上上。
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apety

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
RNA酶不会降解DNA的。。。。。
3楼2014-03-13 12:29:44
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
忆满城风絮(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-13 19:06:19
RnaseA不会降解单链DNA,估计跟你师兄说的一样接头没处理好。
hehe
2楼2014-03-12 21:23:26
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