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farther1990

铜虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
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帖子: 45
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虫号: 1258195
注册: 2011-04-07
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 沉淀蛋白的方法？已有4人参与

我使用荧光配体和受体结合，受体溶解在去污剂中，现在想通过沉淀蛋白，测定游离配体浓度。各位虫友有没有相关经验，求指教！用什么物质来沉淀这个蛋白，还保持蛋白的活性。有相关文献的推荐也行哦~

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不以物喜，不以己悲

1楼 2014-02-24 16:55:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

BioEPI: 2
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红花: 121
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专业: 病毒学

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-26 08:23:56

引用回帖:

8楼: Originally posted by farther1990 at 2014-02-25 14:30:27
主要是想通过沉淀，最后离心，得到最后得到滤液。因为样品量极少，就100ul0.1mg蛋白，我怕普通方法无法完全使蛋白沉淀。尝试使用过30%PEG6000,并没有看到有沉淀形成。很是苦恼啊，我想问下是不是因为我是膜蛋白，里 ...

1 mg/ml的浓度已经不低了，有些去污剂能使蛋白质变性（比如SDS）。
如果不考虑蛋白变性，很容易沉淀。
其它的不知道。