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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 沉淀蛋白的方法？
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farther1990

铜虫 (初入文坛)

[求助] 沉淀蛋白的方法？已有4人参与

我使用荧光配体和受体结合，受体溶解在去污剂中，现在想通过沉淀蛋白，测定游离配体浓度。各位虫友有没有相关经验，求指教！用什么物质来沉淀这个蛋白，还保持蛋白的活性。有相关文献的推荐也行哦~
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不以物喜，不以己悲
1楼2014-02-24 16:55:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-26 08:23:50
1、硫酸铵沉淀，抗体浓缩就用这个方法
2、分子筛离心柱过滤浓缩蛋白质
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7楼2014-02-25 10:24:20
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-26 08:23:56
引用回帖:
8楼: Originally posted by farther1990 at 2014-02-25 14:30:27
主要是想通过沉淀，最后离心，得到最后得到滤液。因为样品量极少，就100ul0.1mg蛋白，我怕普通方法无法完全使蛋白沉淀。尝试使用过30%PEG6000,并没有看到有沉淀形成。很是苦恼啊，我想问下是不是因为我是膜蛋白，里 ...

1 mg/ml的浓度已经不低了，有些去污剂能使蛋白质变性（比如SDS）。
如果不考虑蛋白变性，很容易沉淀。
其它的不知道。
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9楼2014-02-25 15:31:48
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