应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于TCA法沉淀蛋白质。。是要怎么操作的呢？
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知（长期有效）
121/2返回列表12下一页
查看: 3721  |  回复: 11
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

123456120c

新虫 (小有名气)

[求助] 关于TCA法沉淀蛋白质。。是要怎么操作的呢？

我的目的是除掉蛋白质，用的是TCA沉淀法，操作步骤是：2ml提取液+4ml  22%的TCA盐酸溶液，然后沸水浴中反应40min，然后过滤。请问大家这样操作对吗？如果不对，正确的操作方法是什么呢？我的目的不是获得蛋白质，而是要除去蛋白质。谢谢大家了。。我都快郁闷死了。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-09-14 22:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nogojin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-09-17 06:27:42
100%TCA按照1：10的比例加到样品中4度沉淀1h，离心去掉沉淀。留下你的上清就行。
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-16 12:13:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456120c

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nogojin at 2013-09-16 12:13:39
100%TCA按照1：10的比例加到样品中4度沉淀1h，离心去掉沉淀。留下你的上清就行。

为什么要4度呢？
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-17 15:07:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiq250

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-19 07:07:05
10%TCA，-20℃沉淀16h以上，15000rpm离心10分钟，弃沉淀。
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-18 15:44:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456120c

新虫 (小有名气)
★
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-19 07:07:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by shiq250 at 2013-09-18 15:44:12
10%TCA，-20℃沉淀16h以上，15000rpm离心10分钟，弃沉淀。

零下20度。。。16小时？？？？有没有搞错啊 = =
赞一下 回复此楼
5楼2013-09-18 22:26:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiq250

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 123456120c at 2013-09-18 22:26:12
零下20度。。。16小时？？？？有没有搞错啊 = =...

你看没看过文献啊 基本上都是80%acetone -20摄氏度 16h沉淀的
赞一下 回复此楼
6楼2013-09-19 08:48:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456120c

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shiq250 at 2013-09-19 08:48:03
你看没看过文献啊 基本上都是80%acetone -20摄氏度 16h沉淀的...

额  那个条件下是想保持蛋白质的活性？我要的不是蛋白质，单纯是为了除去蛋白质额。。。
赞一下 回复此楼
7楼2013-09-19 20:23:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiq250

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 123456120c at 2013-09-19 20:23:57
额  那个条件下是想保持蛋白质的活性？我要的不是蛋白质，单纯是为了除去蛋白质额。。。...

除去蛋白的话 试一试尿素
赞一下 回复此楼
8楼2013-09-19 23:14:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你就10%TCA，-20℃沉淀16h以上，15000rpm离心10分钟，弃沉淀就行了，
蛋白不就除掉了吗？有没有活性你都弃掉了啊
赞一下 回复此楼
9楼2013-09-26 13:11:05
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123456120c

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by DBWJ at 2013-09-26 13:11:05
你就10%TCA，-20℃沉淀16h以上，15000rpm离心10分钟，弃沉淀就行了，
蛋白不就除掉了吗？有没有活性你都弃掉了啊

谢谢你的回复~但是零下20度沉淀16h这个条件对我们来说太难做到了~其实我要做的实验室检测脂质的过氧化情况~检测之前要先除掉里边儿的蛋白质~如果用16h的话，那我的实验数据不知道会不会受到影响呢。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
10楼2013-09-27 19:57:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 123456120c 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭