24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3231  |  回复: 5

sw07

金虫 (正式写手)

[求助] 有人用三氟乙酸沉淀过蛋白吗?浓度要多大?

如题
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2013-04-04 00:13:31
sw07: 金币+10 2013-04-05 15:55:14
一般10%或15%吧,加0.4倍量就可以了,例如,200 μL的血浆,加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。
2楼2013-04-03 20:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sw07

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-03 20:05:54
一般10%或15%吧,加0.4倍量就可以了,例如,200 μL的血浆,加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。

谢啦,请问10%是指体积比还是重量比?
3楼2013-04-05 15:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sw07 at 2013-04-05 15:55:02
谢啦,请问10%是指体积比还是重量比?...

就是称取1g,用10mL水溶解就可以了,有的时候考虑到回收率的影响,也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为:一定量血浆,加0.4倍量TCA,涡旋30s,室温放置10min-30min,在离心取上清进样分析,仅供参考。另外,我曾经用TCA沉血浆蛋白后,在低波长检测220nm左右检测时发现有很大的拖尾现象(我是梯度洗脱,乙腈比例在10%以内时),不知是否具有普遍性,主要是考虑到TCA的羧基较强,若与待测物质以氢键等结合后,可能会影响检测,但在260nm以上是便无干扰,仅供参考。
4楼2013-04-06 21:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sw07

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-06 21:07:38
就是称取1g,用10mL水溶解就可以了,有的时候考虑到回收率的影响,也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为:一定量血浆,加0.4倍量TCA,涡旋30s,室温放置10min-30min,在离心取上清进样分析,仅供 ...

好的,非常感谢~~~可是实验室现有的TCA是液体,所以很纠结10%指体积比还是重量比?还是TCA是液体的时候,就是v/v,固体的时候是w/v?
5楼2013-04-08 08:10:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sw07 at 2013-04-08 08:10:14
好的,非常感谢~~~可是实验室现有的TCA是液体,所以很纠结10%指体积比还是重量比?还是TCA是液体的时候,就是v/v,固体的时候是w/v?...

TCA 的熔点为57.5℃, 常温下都是固体吧。你用的是TFA(三氟乙酸)吗?若是液体,那就体积比吧。10mlTCA,加90ml的水。
6楼2013-04-08 16:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sw07 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工求调剂! +11 RichLi_ 2026-04-06 11/550 2026-04-06 15:16 by lin-da
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 0703化学调剂325分 +12 15771691647 2026-04-04 13/650 2026-04-06 12:00 by lijunpoly
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +14 刺痛jk 2026-04-06 15/750 2026-04-06 11:57 by lijunpoly
[考研] 华南理工0703化学,总分336求调剂 +8 手机用户 2026-04-03 8/400 2026-04-06 11:48 by lijunpoly
[考研] 一志愿北京化工085600 310分求调剂 +16 0856材料与化工3 2026-04-04 18/900 2026-04-06 01:54 by BruceLiu320
[考研] 331求调剂 +8 于征yz 2026-04-05 8/400 2026-04-06 00:54 by fmesaito
[考研] 272分求调剂 +4 wangyile2233 2026-04-02 4/200 2026-04-05 22:21 by 286640313
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 材料与化工363求推荐 +7 zh096 2026-04-04 7/350 2026-04-05 09:11 by 陌秋26
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:08 by hemengdong
[考研] 一志愿上海大学生物学346 +3 上海大学346调剂 2026-04-03 3/150 2026-04-04 20:20 by dongzh2009
[考研] 085601,一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 368求调剂 +5 今华习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 18:47 by imissbao
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊!
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[考研] 358求调剂 +3 王向阳花 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:56 by zzchen2000
信息提示
请填处理意见