应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 有人用三氟乙酸沉淀过蛋白吗？浓度要多大？
61/1返回列表
查看: 3181  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sw07

金虫 (正式写手)

[求助] 有人用三氟乙酸沉淀过蛋白吗？浓度要多大？

如题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-28 22:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 多谢提供！ 2013-04-04 00:13:31
sw07: 金币+10 2013-04-05 15:55:14
一般10%或15%吧，加0.4倍量就可以了，例如，200 μL的血浆，加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-03 20:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sw07

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-03 20:05:54
一般10%或15%吧，加0.4倍量就可以了，例如，200 μL的血浆，加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。

谢啦，请问10%是指体积比还是重量比？
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-05 15:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sw07 at 2013-04-05 15:55:02
谢啦，请问10%是指体积比还是重量比？...

就是称取1g，用10mL水溶解就可以了，有的时候考虑到回收率的影响，也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为：一定量血浆，加0.4倍量TCA，涡旋30s，室温放置10min-30min，在离心取上清进样分析，仅供参考。另外，我曾经用TCA沉血浆蛋白后，在低波长检测220nm左右检测时发现有很大的拖尾现象（我是梯度洗脱，乙腈比例在10%以内时），不知是否具有普遍性，主要是考虑到TCA的羧基较强，若与待测物质以氢键等结合后，可能会影响检测，但在260nm以上是便无干扰，仅供参考。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-04-06 21:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sw07

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-06 21:07:38
就是称取1g，用10mL水溶解就可以了，有的时候考虑到回收率的影响，也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为：一定量血浆，加0.4倍量TCA，涡旋30s，室温放置10min-30min，在离心取上清进样分析，仅供 ...

好的，非常感谢～～～可是实验室现有的TCA是液体，所以很纠结10%指体积比还是重量比？还是TCA是液体的时候，就是v/v，固体的时候是w/v？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-08 08:10:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqiangz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sw07 at 2013-04-08 08:10:14
好的，非常感谢～～～可是实验室现有的TCA是液体，所以很纠结10%指体积比还是重量比？还是TCA是液体的时候，就是v/v，固体的时候是w/v？...

TCA 的熔点为57.5℃， 常温下都是固体吧。你用的是TFA（三氟乙酸）吗？若是液体，那就体积比吧。10mlTCA，加90ml的水。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-08 16:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sw07 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 304求调剂 +3 ahbd 2026-03-14 3/150 2026-03-16 13:05 by Iveryant
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303，338分，求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭