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1970-01-01 08:00:00
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智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

sw07

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-03 20:05:54
一般10%或15%吧,加0.4倍量就可以了,例如,200 μL的血浆,加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。

谢啦,请问10%是指体积比还是重量比?
3楼2013-04-05 15:55:02
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wqiangz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2013-04-04 00:13:31
sw07: 金币+10 2013-04-05 15:55:14
一般10%或15%吧,加0.4倍量就可以了,例如,200 μL的血浆,加80 μL的TCA就可以沉淀98%以上的蛋白了。
2楼2013-04-03 20:05:54
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wqiangz

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sw07 at 2013-04-05 15:55:02
谢啦,请问10%是指体积比还是重量比?...

就是称取1g,用10mL水溶解就可以了,有的时候考虑到回收率的影响,也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为:一定量血浆,加0.4倍量TCA,涡旋30s,室温放置10min-30min,在离心取上清进样分析,仅供参考。另外,我曾经用TCA沉血浆蛋白后,在低波长检测220nm左右检测时发现有很大的拖尾现象(我是梯度洗脱,乙腈比例在10%以内时),不知是否具有普遍性,主要是考虑到TCA的羧基较强,若与待测物质以氢键等结合后,可能会影响检测,但在260nm以上是便无干扰,仅供参考。
4楼2013-04-06 21:07:38
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sw07

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wqiangz at 2013-04-06 21:07:38
就是称取1g,用10mL水溶解就可以了,有的时候考虑到回收率的影响,也可以用甲醇或乙腈与水配成一定比例作溶剂。具体操作为:一定量血浆,加0.4倍量TCA,涡旋30s,室温放置10min-30min,在离心取上清进样分析,仅供 ...

好的,非常感谢~~~可是实验室现有的TCA是液体,所以很纠结10%指体积比还是重量比?还是TCA是液体的时候,就是v/v,固体的时候是w/v?
5楼2013-04-08 08:10:14
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