24小时热门版块排行榜    

查看: 5406  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

[求助] QPCR扩增曲线异常 已有7人参与

我有对引物,普通PCR并电泳检测,条带很亮,大小也是我需要的,到了QPCR上,溶解曲线正常,扩增曲线很奇怪,没有CT值,你们遇到过吗?什么原因啊?金币不多啊,悬赏有限啊谢谢
QPCR扩增曲线异常
amplication plot.jpg


QPCR扩增曲线异常-1
melt curve.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的荧光信号值好低,我做的一般都是100000以上的,应该是探针出了问题,换个探针试试,或者把荧光PCR产物跑下电泳看看有没有产物,有产物的话肯定是探针的问题。
8楼2014-02-21 22:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

shiyiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:48
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带,说明有产物。
溶解曲线还可以,但不是很尖锐,说明反应孔没有选错误。

会不会有污染?或者探针失效?
有没有正对照或负对照?结果都类似吗?
2楼2014-02-19 22:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:54
1)浓度太高了;2)就没有进行PCR酶活性成了问题;3)说不清的因素。
3楼2014-02-19 22:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shiyiyaya at 2014-02-19 22:21:38
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带,说明有产物。
溶解曲线还可以,但不是很尖锐,说明反应孔没有选错误。

会不会有污染?或者探针失效?
有没有正对照或负对照?结果都类似吗?

不会是污染的问题,我这对引物试了多次都是这个结果,内参引物的扩增是正常的。谢谢你的答复
4楼2014-02-20 00:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +8 枫桥ZL 2026-03-18 10/500 2026-03-21 15:29 by Shawn0911
[考研] 280求调剂 +8 咕噜晓晓 2026-03-18 9/450 2026-03-21 15:01 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +9 吃吃吃才有意义 2026-03-19 9/450 2026-03-21 13:28 by 邹gv
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 336求调剂 +3 rmc8866 2026-03-21 3/150 2026-03-21 11:16 by 求调剂zz
[考研] 302求调剂 +11 呼呼呼。。。。 2026-03-17 11/550 2026-03-21 08:29 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸! 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
请填处理意见