应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » QPCR扩增曲线异常
51/1返回列表
查看: 5223  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

[求助] QPCR扩增曲线异常 已有7人参与

我有对引物，普通PCR并电泳检测，条带很亮，大小也是我需要的，到了QPCR上，溶解曲线正常，扩增曲线很奇怪，没有CT值，你们遇到过吗？什么原因啊？金币不多啊，悬赏有限啊谢谢
QPCR扩增曲线异常
amplication plot.jpg


QPCR扩增曲线异常-1
melt curve.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-19 22:09:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:54
1）浓度太高了；2）就没有进行PCR酶活性成了问题；3）说不清的因素。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-02-19 22:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

shiyiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:48
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带，说明有产物。
溶解曲线还可以，但不是很尖锐，说明反应孔没有选错误。

会不会有污染？或者探针失效？
有没有正对照或负对照？结果都类似吗？
赞一下 回复此楼
2楼2014-02-19 22:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misszwh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shiyiyaya at 2014-02-19 22:21:38
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带，说明有产物。
溶解曲线还可以，但不是很尖锐，说明反应孔没有选错误。

会不会有污染？或者探针失效？
有没有正对照或负对照？结果都类似吗？

不会是污染的问题，我这对引物试了多次都是这个结果，内参引物的扩增是正常的。谢谢你的答复
赞一下 回复此楼
4楼2014-02-20 00:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misszwh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by forrestgump at 2014-02-19 22:31:06
1）浓度太高了；2）就没有进行PCR酶活性成了问题；3）说不清的因素。

我试了降低引物和模板的量，但是结果都一样。酶没有问题的。谢谢您的答复
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-20 00:54:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭