24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5458  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

[求助] QPCR扩增曲线异常 已有7人参与

我有对引物,普通PCR并电泳检测,条带很亮,大小也是我需要的,到了QPCR上,溶解曲线正常,扩增曲线很奇怪,没有CT值,你们遇到过吗?什么原因啊?金币不多啊,悬赏有限啊谢谢
QPCR扩增曲线异常
amplication plot.jpg


QPCR扩增曲线异常-1
melt curve.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:54
1)浓度太高了;2)就没有进行PCR酶活性成了问题;3)说不清的因素。
3楼2014-02-19 22:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

shiyiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-20 08:25:48
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带,说明有产物。
溶解曲线还可以,但不是很尖锐,说明反应孔没有选错误。

会不会有污染?或者探针失效?
有没有正对照或负对照?结果都类似吗?
2楼2014-02-19 22:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shiyiyaya at 2014-02-19 22:21:38
没遇到类似情况。
DNA电泳能看见条带,说明有产物。
溶解曲线还可以,但不是很尖锐,说明反应孔没有选错误。

会不会有污染?或者探针失效?
有没有正对照或负对照?结果都类似吗?

不会是污染的问题,我这对引物试了多次都是这个结果,内参引物的扩增是正常的。谢谢你的答复
4楼2014-02-20 00:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misszwh

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by forrestgump at 2014-02-19 22:31:06
1)浓度太高了;2)就没有进行PCR酶活性成了问题;3)说不清的因素。

我试了降低引物和模板的量,但是结果都一样。酶没有问题的。谢谢您的答复
5楼2014-02-20 00:54:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 272分材料子求调剂 +38 Loy0361 2026-04-10 49/2450 2026-04-12 12:46 by BruceLiu320
[考研] 277求调剂 +21 倪建设 2026-04-06 21/1050 2026-04-12 12:27 by laoshidan
[考研] 335求调剂 +13 想上岸呀!! 2026-04-12 13/650 2026-04-12 11:37 by 柴小白
[考研] 材料考研调剂 +25 云木达达 2026-04-11 27/1350 2026-04-12 10:41 by zhouyuwinner
[考研] 327求调剂 +5 拾光任染 2026-04-06 5/250 2026-04-12 02:29 by 秋豆菜芽
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 材料与化工调剂 10+11 下一站上岸@ 2026-04-10 36/1800 2026-04-11 10:26 by 89436494
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分,英语六级,求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +21 吃的不少 2026-04-05 24/1200 2026-04-08 16:47 by sunhuadong
[考研] 调剂求助(生物与医药) +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见