24小时热门版块排行榜    

查看: 1287  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

子潇杨帆

金虫 (初入文坛)

[求助] 诚心求教各位前辈:筛选扩增体系时的PCR图片,这是怎么回事啊?

紧急求教各位前辈:
刚开始做SCoT分子标记对玫瑰的最优扩增体系的筛选,刚刚开始跑PCR(普通的),结果结果成了这样,弥散的好厉害,尤其是第二次跑的这次,连marker都看不清楚,像重影似的,请教各位前辈能否给以指点,诚心求教出现这种情况的原因是什么,我该怎么解决啊???
我的扩增程序设定的为:94℃预变性 5 min;94℃变性 1 min,50℃退火 1 min,72℃ 延伸 2 min,共 36 个循环;72℃最后延伸 10 min。
诚心求教各位前辈:筛选扩增体系时的PCR图片,这是怎么回事啊?
11-7(筛)_副本.jpg


诚心求教各位前辈:筛选扩增体系时的PCR图片,这是怎么回事啊?-1
11-7(筛2)_副本.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子潇杨帆

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wanghx_2012 at 2013-11-08 13:52:42
请你把电泳的条件列出来,包括电压,胶浓度,电泳时间,电流大小,再作分析。

电泳条件:电压120,电流190,功率40;2%琼脂糖凝胶;电泳时间我一般以电泳的条带跑到整个胶块的3/4处停止,如果是大胶的话一个多小时吧,如果是大胶的一半就大约40分钟~50分钟。希望前辈给予指点~~
4楼2013-11-08 15:10:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker都出现弥散了,只有两种原因:1,你的marker质量出现问题。2,你的凝胶分辨率太高,将marker都给分辨了。但是第一个问题一般不会出现,所以应该是凝胶的分辨率太高,电压和胶浓度都有影响,稍微降低一下胶的浓度可以改观。
我不会!
2楼2013-11-08 11:01:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghx_2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请你把电泳的条件列出来,包括电压,胶浓度,电泳时间,电流大小,再作分析。
3楼2013-11-08 13:52:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子潇杨帆

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 三蛰 at 2013-11-08 11:01:21
marker都出现弥散了,只有两种原因:1,你的marker质量出现问题。2,你的凝胶分辨率太高,将marker都给分辨了。但是第一个问题一般不会出现,所以应该是凝胶的分辨率太高,电压和胶浓度都有影响,稍微降低一下胶的浓 ...

我用的胶浓度为2%的,我会尝试一下降低胶的浓度,十分感谢!
5楼2013-11-08 15:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见