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荧光定量PCR标准曲线有问题 乱飞
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今天跑得标准曲线结果，大虾们看看是什么原因！ QQ截图20000825162720.png |
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cicelyzh
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3楼2013-08-25 23:28:10
qingyuansw20
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-25 22:37:55
紫衫月影: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢啦，我今天跑跑再试试 2013-08-26 11:04:16
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1、从溶解曲线上看，都在一个点发生，排除了引物的问题。 2、不是引物问题就是楼主的加样方法有问题。 3、标准曲线的做法是以10倍作为稀释倍数进行，所以再加样时提高精确度，通常都是分装的办法。如：每个浓度做三个管，共做5个浓度，10倍稀释。则你要准备4个管的量。第一个最大浓度混合完毕后分装到体积相同三个管中，第四个管进行稀释，然后再分装。以此类推。 4、不论你怎么加样，一定要总的开始分的结束。 |
2楼2013-08-25 18:50:33
4楼2013-08-26 14:42:13
5楼2013-08-26 14:43:40
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