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荧光定量PCR标准曲线有问题 乱飞
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qingyuansw20
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-25 22:37:55
紫衫月影: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢啦,我今天跑跑再试试 2013-08-26 11:04:16
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1、从溶解曲线上看,都在一个点发生,排除了引物的问题。 2、不是引物问题就是楼主的加样方法有问题。 3、标准曲线的做法是以10倍作为稀释倍数进行,所以再加样时提高精确度,通常都是分装的办法。如:每个浓度做三个管,共做5个浓度,10倍稀释。则你要准备4个管的量。第一个最大浓度混合完毕后分装到体积相同三个管中,第四个管进行稀释,然后再分装。以此类推。 4、不论你怎么加样,一定要总的开始分的结束。 |
2楼2013-08-25 18:50:33
cicelyzh
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