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还是云霄

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR的电泳图 条带后有很长的脱带 什么情况， 我这是PCR回收之后再进行PCR

我这是PCR产物切目的条带然后再进行PCR的电泳图 引物为4F 907R 我做的是土壤中的甲烷菌多样性。
PCR的电泳图 条带后有很长的脱带 什么情况， 我这是PCR回收之后再进行PCR
20120719.  回收DNA 后RCR（4f 907R）.jpg
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1楼 2013-08-02 11:07:39
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mmz123250

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
还是云霄: 金币+2, ★有帮助, 谢谢帮助 2013-08-02 12:51:27
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-02 12:54:19
从图看，有两组共5个样，一个M。那个才是你的目标样呢。如果模板是割胶回收的PCR产物，你的M也有轻微的拖带，可能两方面原因：1、电泳缓冲液问题；2、考虑到多样性，你的模板可能并不纯，重新设计引物，将引物加长，继续以第一次回收的PCR产物为模板进行PCR。
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2楼2013-08-02 12:13:55
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要是M也拖带的话，样品拖带就正常了，有可能是跑胶的过程中电流过大了，引物什么的应该是先把M跑的不拖带之后应该考虑的问题，先试着改变电流跑着试试，换成新的电泳液试试
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may
3楼2013-08-05 10:39:26
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