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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 相对荧光定量cDNA的问题
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thinkerboy

铁虫 (小有名气)

[求助] 相对荧光定量cDNA的问题

求问坛子里的各位大神，我做相对荧光定量，首先提组织RNA，然后反转录成cDNA，以cDNA做模板做荧光定量，我主要做不同组织里的目的基因的相对表达量，请问我在提各个组织RNA，反转录后，要不要将各个组织反转录的cDNA测一下浓度，然后将各个组织的cDNA浓度稀释调整到相同的浓度，作为模板做荧光定量。也就是说我需要调整一下RNA浓度再反转录，或者是统一一下各个组织的cDNA浓度再作模板吗。

[ Last edited by thinkerboy on 2013-7-26 at 21:10 ]
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1楼 2013-07-26 21:00:26
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
thinkerboy(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-27 21:44:44
你描述的这个其实就是不同sample之间互相比较时 “均一化”的概念:normalization。
而qPCR常用的均一化手段就是通过一个被认为在不同组织中表达量恒定的基因作为标杆，即内参基因，比如actin。
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3楼2013-07-27 19:43:15
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