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[求助]
很奇怪的酶切连接问题
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| 我分别双酶切表达载体和T-载体,再分别回收目的片段(16000bp和1100bp),在连接热击转化,挑取单克隆,pcr验证,挑阳性测序,测序结果正确(因为表达载体没有通用引物,所以就用的自己的目的片段的引物测序,据师兄说这样测序开头和结尾是不准确的,中间的序列才有说服力,测序的结果表明中间的序列确实是我目的片段上的序列,因此我觉得我连接成功了,这样理解不知对不对?),可奇怪的是:我再双酶切重组质粒时却切不下来了,试了好几次,也试着改变酶切体系,可还是不行,没有目的条带,只有质粒一条带,求解。。。。。。。。 |
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9楼2013-07-04 10:32:23
bleach060452
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2楼2013-06-30 14:54:05

3楼2013-06-30 21:01:26
flyy1986
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- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2013-06-30 23:26:52













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