| 查看: 1973 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
很奇怪的酶切连接问题
|
|||
| 我分别双酶切表达载体和T-载体，再分别回收目的片段（16000bp和1100bp），在连接热击转化，挑取单克隆，pcr验证，挑阳性测序，测序结果正确（因为表达载体没有通用引物，所以就用的自己的目的片段的引物测序，据师兄说这样测序开头和结尾是不准确的，中间的序列才有说服力，测序的结果表明中间的序列确实是我目的片段上的序列，因此我觉得我连接成功了，这样理解不知对不对？），可奇怪的是：我再双酶切重组质粒时却切不下来了，试了好几次，也试着改变酶切体系，可还是不行，没有目的条带，只有质粒一条带，求解。。。。。。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有52人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- T4酶切连接求助！
已经有17人回复
- 酶切后的补平连接
已经有9人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- 有没有用过XmnI这个酶的?酶切后连接需要注意什么问题么？
已经有12人回复
- 双酶切之后，线状质粒的连接问题
已经有13人回复
- 单酶切连接转化，感受态的问题？！
已经有11人回复
- 载体和酶切片段连接的问题
已经有5人回复
- 谁用过Fermentas的T4连接酶？
已经有23人回复
- 平末端连接做不出来克隆
已经有30人回复
- 酶切后未纯化连接出现的问题
已经有18人回复
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- AFLP酶切连接 求高人指点啊
已经有11人回复
- 单酶切连接的问题
已经有4人回复
- DNA双酶切后在两端加adapter的连接问题
已经有7人回复
- 连接酶切问题
已经有10人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 为什么我做的酶切连接总是不长斑呢？
已经有24人回复
- 【求助/交流】该死的酶切
已经有6人回复
- 【求助/交流】关于酶切产物连接的一点问题
已经有13人回复
flyy1986
铜虫 (小有名气)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 89.5
- 散金: 51
- 帖子: 104
- 在线: 47.5小时
- 虫号: 1736856
- 注册: 2012-04-04
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2013-06-30 23:26:52
bleach060452
新虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 969.9
- 散金: 15
- 红花: 4
- 帖子: 201
- 在线: 88.2小时
- 虫号: 1004577
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2013-06-30 14:54:05
3楼2013-06-30 21:01:26
zhlf1989513
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 62 (初中生)
- 金币: 1806.2
- 红花: 2
- 帖子: 252
- 在线: 257.5小时
- 虫号: 1794702
- 注册: 2012-05-04
- 性别: GG
- 专业: 系统生物学
5楼2013-07-01 08:00:18