应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的PCR电泳图，求高手指点
51/1返回列表
查看: 1784  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

[求助] 我的PCR电泳图，求高手指点

这张图片是我跑的PCR电泳图,试剂用量
dNTP:5uL,
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.
Template:0.5uL.
Primer（F/R）:1uL.
Enzyme(上海生工):1uL.
ddH2O:32.5uL.
我的PCR电泳图，求高手指点
2013-6-23-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
learn to smile at life~~
1楼 2013-06-23 21:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by langduiyue at 2013-06-24 10:57:16
LZ做的单重多重PCR呀？
给体积没用的， 要具体用量，  例如： 引物多少pMol,  镁离子 多少 mMol
建议先查看引物如何， 有无二级结构， 有无非特异位点， 引物OK 成功一半
引物OK 做个温度梯度，查找合适退火温 ...

引物是老师设计好给的，直接用的，具体信息不清楚，老实说实在不行就做个T载体连接，提质粒，再PCR，电泳。。。
赞一下 回复此楼
learn to smile at life~~
8楼2013-06-25 11:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:08
没有标明各种母液的浓度和酶的种类，不好判断浓度是否合适。还有，最好能说明模板是什么，有没有定量？PCR产物的大小是多少，引物的Tm值是多少，PCR程序怎样设置的。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-24 06:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:46
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 07:54:48
你的条带不太均一，没有marker，图也不清楚，说不太好。不知道你用的什么酶，降低镁离子浓度也许有帮助。另，反应体系降到25微升试试，反应体系小，温度也会精确一些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-24 07:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
LZ做的单重多重PCR呀？
给体积没用的， 要具体用量，  例如： 引物多少pMol,  镁离子 多少 mMol
建议先查看引物如何， 有无二级结构， 有无非特异位点， 引物OK 成功一半
引物OK 做个温度梯度，查找合适退火温度
如效果不佳， 最对试剂用量， 反应条件，做调整。

记得一定要有 阳性和阴性对照
赞一下 回复此楼
角逐自我
4楼2013-06-24 10:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +5 77chaselx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 23:42 by lovewei0727
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 8/400 2026-03-20 15:58 by babero
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 10/500 2026-03-19 15:08 by 阳阳哇塞
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +3 我爱生物生物爱� 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:12 by macy2011
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭