24小时热门版块排行榜    

查看: 1783  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

[求助] 我的PCR电泳图,求高手指点

这张图片是我跑的PCR电泳图,试剂用量
dNTP:5uL,
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.
Template:0.5uL.
Primer(F/R):1uL.
Enzyme(上海生工):1uL.
ddH2O:32.5uL.
我的PCR电泳图,求高手指点
2013-6-23-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

learn to smile at life~~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:46
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 07:54:48
你的条带不太均一,没有marker,图也不清楚,说不太好。不知道你用的什么酶,降低镁离子浓度也许有帮助。另,反应体系降到25微升试试,反应体系小,温度也会精确一些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-06-24 07:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:08
没有标明各种母液的浓度和酶的种类,不好判断浓度是否合适。还有,最好能说明模板是什么,有没有定量?PCR产物的大小是多少,引物的Tm值是多少,PCR程序怎样设置的。
2楼2013-06-24 06:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LZ做的单重多重PCR呀?
给体积没用的, 要具体用量,  例如: 引物多少pMol,  镁离子 多少 mMol
建议先查看引物如何, 有无二级结构, 有无非特异位点, 引物OK 成功一半
引物OK 做个温度梯度,查找合适退火温度
如效果不佳, 最对试剂用量, 反应条件,做调整。

记得一定要有 阳性和阴性对照
角逐自我
4楼2013-06-24 10:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

谢谢各位指点,dNTP:5uL,(0.25mM)
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.(2mM)
Template:0.5uL.(--10ng)
Primer(F/R):1uL.
Enzyme(上海生工Taq):1uL.(2.5u)
ddH2O:32.5uL.
learn to smile at life~~
5楼2013-06-25 11:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +6 梨花珞晚风 2026-03-17 6/300 2026-03-21 03:40 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 278求调剂 +6 烟火先于春 2026-03-17 6/300 2026-03-21 01:57 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 0703化学调剂 +10 妮妮ninicgb 2026-03-15 14/700 2026-03-19 22:59 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
请填处理意见