24小时热门版块排行榜    

查看: 2044  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

[求助] 我的PCR电泳图,求高手指点

这张图片是我跑的PCR电泳图,试剂用量
dNTP:5uL,
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.
Template:0.5uL.
Primer(F/R):1uL.
Enzyme(上海生工):1uL.
ddH2O:32.5uL.
我的PCR电泳图,求高手指点
2013-6-23-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

learn to smile at life~~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by chunfengxiyu at 2013-06-25 11:13:46
谢谢各位指点,dNTP:5uL,(0.25mM)
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.(2mM)
Template:0.5uL.(--10ng)
Primer(F/R):1uL.
Enzyme(上海生工Taq):1uL.(2.5u)
ddH2O:32.5uL.

目的片段是500bp
learn to smile at life~~
6楼2013-06-25 11:15:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:08
没有标明各种母液的浓度和酶的种类,不好判断浓度是否合适。还有,最好能说明模板是什么,有没有定量?PCR产物的大小是多少,引物的Tm值是多少,PCR程序怎样设置的。
2楼2013-06-24 06:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:46
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 07:54:48
你的条带不太均一,没有marker,图也不清楚,说不太好。不知道你用的什么酶,降低镁离子浓度也许有帮助。另,反应体系降到25微升试试,反应体系小,温度也会精确一些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-06-24 07:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LZ做的单重多重PCR呀?
给体积没用的, 要具体用量,  例如: 引物多少pMol,  镁离子 多少 mMol
建议先查看引物如何, 有无二级结构, 有无非特异位点, 引物OK 成功一半
引物OK 做个温度梯度,查找合适退火温度
如效果不佳, 最对试剂用量, 反应条件,做调整。

记得一定要有 阳性和阴性对照
角逐自我
4楼2013-06-24 10:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见