应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的PCR电泳图，求高手指点
51/1返回列表
查看: 1651  |  回复: 9
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chunfengxiyu

新虫 (正式写手)

[求助] 我的PCR电泳图，求高手指点

这张图片是我跑的PCR电泳图,试剂用量
dNTP:5uL,
10*Buffer5uL.
Mg2+:4uL.
Template:0.5uL.
Primer（F/R）:1uL.
Enzyme(上海生工):1uL.
ddH2O:32.5uL.
我的PCR电泳图，求高手指点
2013-6-23-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
learn to smile at life~~
1楼2013-06-23 21:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chunfengxiyu: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-25 21:53:15
胶的浓度，跑胶的时间可能不太少，建议浓度大点，时间长点。mark没跑开，，模板浓度小一点。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-25 11:24:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:08
没有标明各种母液的浓度和酶的种类，不好判断浓度是否合适。还有，最好能说明模板是什么，有没有定量？PCR产物的大小是多少，引物的Tm值是多少，PCR程序怎样设置的。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-24 06:23:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 同意 2013-06-24 07:54:46
1949stone: 回帖置顶 2013-06-24 07:54:48
你的条带不太均一，没有marker，图也不清楚，说不太好。不知道你用的什么酶，降低镁离子浓度也许有帮助。另，反应体系降到25微升试试，反应体系小，温度也会精确一些。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-24 07:24:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
LZ做的单重多重PCR呀？
给体积没用的， 要具体用量，  例如： 引物多少pMol,  镁离子 多少 mMol
建议先查看引物如何， 有无二级结构， 有无非特异位点， 引物OK 成功一半
引物OK 做个温度梯度，查找合适退火温度
如效果不佳， 最对试剂用量， 反应条件，做调整。

记得一定要有 阳性和阴性对照
赞一下 回复此楼
角逐自我
4楼2013-06-24 10:57:16
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭