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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE蛋白电泳
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周小芬

铜虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE蛋白电泳 已有12人参与

我是生物菜鸟，本科是学化学的，想问问跑SDS-PAGE蛋白电泳时浓缩胶电压60V分离胶电压是120V 行吗？我整个过程没用到2个小时，是不是太快了，太快了有没有什么影响。
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分子生物学
1楼 2013-05-15 20:48:58
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

雨梦无声

金虫 (著名写手)
★
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关键在你的胶配方……

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3楼2013-05-15 23:56:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
变性蛋白电泳快一点问题不是很大。虽然快一点会发热多一点，但对SDS-PAGE影响不大，只要不是特别热。你设的那些电压应该是mini胶的，而且也不是很快。至于两个小时什么的，要看你的胶有多大，一般除了考虑胶的大小，电压以外，你要看一下实际电流。真正发热是看功率的。一般的电流不超过20mA/gel就可以的。
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4楼2013-05-16 07:02:45
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飞天36

银虫 (小有名气)
★
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分子克隆写的，电泳一般是15V/cm
我们实验室一般分离胶和浓缩胶，所用电压差不多
如果你想跑的条带好看一点，电压稍微小一点，分离效果比较好
但也不能太小，防止蛋白扩散速度比电泳速度还快
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生活很多不如意，现在想给变
6楼2013-05-16 13:41:58
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普通回帖

不转录的DNA

金虫 (小有名气)
★
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楼主，你的做法是对的，你不用怀疑！我们平常做的也就是先60V浓缩，后120V分离！至于时间的长短，你感觉有影响吗？只要你的胶配的浓度是对的！

像过去用的那种很长的玻璃槽，需要需要琼脂封闭的那种！和现在你买的那种斜插式小槽能比吗？肯定是前者的电泳时间长点啊！时间长短并不能说明问题！！！

我现在用的那种梯度胶，半个小时到40min就能跑完！你说能比吗？？？？

希望能帮你解惑！！！
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

tuming0302
长得比我英俊的，没我有才华！有才华的，没我长得俊！
2楼2013-05-15 21:02:48
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献
★
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2块的话都还在承受范围！我2块放冰上分离胶稳流50ma都跑过，条带很清晰（除了14kd以下）一块肯定高了，从你跑胶时间看还算正常，如果接近1h，那胶多半跑差了！

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Dripping Concentrated!!energetic and active！
5楼2013-05-16 07:51:57
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sanmiao

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们通常的做法是，浓缩胶80v，分离胶160-180.一个小时就结束战斗，如果怕发热，放一个冰袋在电泳槽里，一点问题都没有！

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7楼2013-05-16 13:48:29
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如艺小果果

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同楼上，分离胶快一点是没有影响的，省时间
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8楼2013-05-17 11:02:23
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sd3824289

木虫 (正式写手)
60-120不大，时间最好不要太久！这样对样品不好！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
9楼2013-05-17 15:22:09
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nemo88

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
10楼2013-05-18 00:21:46
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