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周小芬

铜虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE蛋白电泳 已有12人参与

我是生物菜鸟,本科是学化学的,想问问跑SDS-PAGE蛋白电泳时浓缩胶电压60V分离胶电压是120V 行吗?我整个过程没用到2个小时,是不是太快了,太快了有没有什么影响。
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分子生物学
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tuming0302

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
2楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-15 21:02:48
楼主,你的做法是对的,你不用怀疑!我们平常做的也就是先60V浓缩,后120V分离!至于时间的长短,你感觉有影响吗?只要你的胶配的浓度是对的!

像过去用的那种很长的玻璃槽,需要需要琼脂封闭的那种!和现在你买 ...

请问跑梯度胶时,电泳电压是怎么设置的啊?也是先80V后换成120V吗?
13楼2013-06-26 16:25:35
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,你的做法是对的,你不用怀疑!我们平常做的也就是先60V浓缩,后120V分离!至于时间的长短,你感觉有影响吗?只要你的胶配的浓度是对的!

像过去用的那种很长的玻璃槽,需要需要琼脂封闭的那种!和现在你买的那种斜插式小槽能比吗?肯定是前者的电泳时间长点啊!时间长短并不能说明问题!!!

我现在用的那种梯度胶,半个小时到40min就能跑完!你说能比吗????

希望能帮你解惑!!!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
2楼2013-05-15 21:02:48
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雨梦无声

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
关键在你的胶配方……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-05-15 23:56:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
变性蛋白电泳快一点问题不是很大。虽然快一点会发热多一点,但对SDS-PAGE影响不大,只要不是特别热。你设的那些电压应该是mini胶的,而且也不是很快。至于两个小时什么的,要看你的胶有多大,一般除了考虑胶的大小,电压以外,你要看一下实际电流。真正发热是看功率的。一般的电流不超过20mA/gel就可以的。
4楼2013-05-16 07:02:45
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