应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的片段连接T载体问题~
41/1返回列表
查看: 1272  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xjtu0025

新虫 (小有名气)

[交流] 目的片段连接T载体问题~

求问,我PCR一段目的片段,是要做表达的.是完整的蛋白阅读框,有ATG.我打算连到T载体上面然后酶切再跟pET-32a连接.现在想问一下,因为我连T载体以后再酶切前后会多几个bp,选的是pMD-18T.用ECRO I 和HIND III切.这样会影响后续蛋白表达么?

另外我知道一定要注意不能引起阅读框的问题.我想问一下,这样酶连还是要去数阅读框有没有移么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-05-09 23:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xjtu0025(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-11 14:54:56
有ATG，多几个bp不会影响表达的
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-10 14:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小冬

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xjtu0025(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-11 14:55:11
需要测序的，表达是从个ATG还是的，如果多出的不是从ATG开始三的倍数，恰恰又有ATG，那就……
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-11 13:26:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjtu0025

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李小冬 at 2013-05-11 13:26:33
需要测序的，表达是从个ATG还是的，如果多出的不是从ATG开始三的倍数，恰恰又有ATG，那就……

后来我去掉了我的片段的ATG...
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-11 13:44:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xjtu0025 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭