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slk8349

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 10
在线: 2.7小时
虫号: 2084888
注册: 2012-10-25
专业: 基础兽医学

[求助] 构建载体后，菌液PCR，没有目的条带！！！已有1人参与

我是从T载体上将目的片段用xbaⅠ，和hindⅢ直接双酶切，与我的载体pcmv连接，转化后，平板上菌落长得很好，可是做菌液PCR鉴定是，根本P不出来目的片段，请问是哪里有问题啊？看来好多的帖子，大家都说是不长菌落，可是我的菌落长的很好啊，而且我重复做了两次，结果都一样！我也做了酶切鉴定，xbaⅠ，和hindⅢ可以准确的从T载体上切下我的目的片段，而且，对PCMV也做了酶切，效果很好！求高人指点！！

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1楼 2013-04-27 23:38:59

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senix

木虫 (小有名气)

应助: 32 (小学生)
金币: 5122.1
散金: 200
红花: 1
帖子: 66
在线: 278.8小时
虫号: 330877
注册: 2007-03-24
性别: GG
专业: 免疫生物学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

如果连接效率高的话，直接提取质粒酶切鉴定不就可以了！

做实验就是和上帝玩游戏！

5楼2013-04-28 15:29:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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