24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 6712  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1989zb

金虫 (小有名气)

[求助] pcr目的条带暗,怎么办呢??

最近一直pcr,可是目的条带总是很暗,该怎么优化条件呢?而且在胶回收后用同样的条件跑,连条带都没有,目的片段大小1500bp
反应条件:94度 4min 94度 30s  52度30s  72 度 90s  72度10min  
该怎么优化呢??

未命名.jpg



胶回收稀释后pcr.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

PCR技术

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1989zb

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-11 10:51:44
第一次做体系大一点,切目的条带,回收,以回收产物为模板再P,再结合优化PCR条件因该会好些!...

第二张图片就是胶回收在p  的 结果什么都没p 出来  不管是用胶回收原液或者稀释的都没p出来 郁闷的很
浓度不够没办法测序这才真郁闷了。
5楼2013-03-11 11:01:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1989zb: 金币+1 2013-03-13 07:48:18
杂带比较多,可以升高退火温度,比如做个touchdown PCR,或者梯度PCR,找到最适退火温度,再PCR!
寻找真正的自我!
2楼2013-03-11 10:07:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1989zb

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhs521521 at 2013-03-11 10:07:35
杂带比较多,可以升高退火温度,比如做个touchdown PCR,或者梯度PCR,找到最适退火温度,再PCR!

怎么才能让条带更亮呢
3楼2013-03-11 10:44:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1989zb at 2013-03-11 10:44:30
怎么才能让条带更亮呢...

第一次做体系大一点,切目的条带,回收,以回收产物为模板再P,再结合优化PCR条件因该会好些!
4楼2013-03-11 10:51:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 332求调剂 +5 Lyy930824@ 2026-03-29 5/250 2026-03-30 10:50 by 唐沐儿
[考研] 生物技术与工程 +6 1294608413 2026-03-25 7/350 2026-03-30 10:42 by daviegao2015
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
请填处理意见