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1989zb

金虫 (小有名气)

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[求助] pcr目的条带暗，怎么办呢？？

最近一直pcr,可是目的条带总是很暗，该怎么优化条件呢？而且在胶回收后用同样的条件跑，连条带都没有，目的片段大小1500bp
反应条件：94度 4min 94度 30s 52度30s 72 度 90s 72度10min
该怎么优化呢？？

未命名.jpg

胶回收稀释后pcr.jpg

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1楼 2013-03-11 09:33:59

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lhs521521

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
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1989zb: 金币+1 2013-03-13 07:48:18

杂带比较多，可以升高退火温度，比如做个touchdown PCR，或者梯度PCR，找到最适退火温度，再PCR！

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寻找真正的自我！

2楼2013-03-11 10:07:35

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