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碧海行帆

金虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 1549503
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性别: GG
专业: 植物病理学

[求助] 真菌转化子PCR验证问题

跟大家探讨一个问题，我做真菌的基因敲除，目前得到了24个转化子，进行PCR验证的时候，抗性基因也就是阳性对照成功扩出，要敲除的目的基因都没有扩出，按理说应该是都敲除了，但转化率达到了100%，大家说有这种可能吗？？？

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硕士毕业去找工作

1楼2013-01-05 17:35:48

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haiwoshishui

木虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
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专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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碧海行帆: 金币+2 2013-01-07 10:46:45
碧海行帆: 金币+1 2013-01-08 15:00:27

我的基因敲除300多个转化子才有16株是敲除的。你怎么才得到这么少的转化子并且都是敲除的呢？可以做杂交进一步验证一下。PS：你要不要做回补实验？有木有合适的回补载体？我正为回补载体的事犯愁呢。

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7楼2013-01-06 13:25:40

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