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yinchengmiao

铜虫 (初入文坛)

[求助] 土壤DNA提取,真菌通用引物PCR,琼脂糖电泳图,感觉有问题,新手求助

什么问题导致得出现此问题啊?
第一张图片琼脂糖浓度为1%,PCR反应体系,mix 25ul,上下游引物各2ul,模板为5ul,反应体系为50ul。反应条件:94预变性2min,94变性30秒,50退火30秒,72延伸1min15秒,36个循环,终延伸72,10min,电泳上样量为10ul,100bp Ladder 上样量为5ul.
第二张图片琼脂糖浓度为2%,PCR反应体系,mix 25ul,上下游引物各2ul,模板为10ul,反应体系为50ul。反应条件:94预变性2min,94变性30秒,50退火30秒,72延伸1min15秒,36个循环,终延伸72,10min,电泳上样量为20ul,100bp Ladder 上样量为10ul.为什么条带那样啊?新手求原因,望大家多多指教

上样量10ul



上样量20ul,出现两个亮条带的PCR加的模板量是出现一个两条带的两倍
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yinchengmiao

铜虫 (初入文坛)

用的100bp Ladder,分别为100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp、800bp、1000bp和1500bp
2楼2012-06-18 09:23:51
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uneei

金虫 (小有名气)

我还是第一次看到这种条带,等高人解答
3楼2012-06-18 09:55:48
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)

第一次看到这种图片,惊奇中
4楼2012-06-18 13:41:13
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker和样品的条带一样奇怪,明显就是胶做的有问题吧。
5楼2012-06-18 13:50:18
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healerly

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

6楼2012-06-18 15:59:35
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sheng-ping

铜虫 (小有名气)

跑的太快了!有可能是电泳液量少
城市农民
7楼2012-06-18 16:15:58
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jry_2002

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可能电压有些大,跑电泳的电压大,胶孔太大
8楼2013-01-16 09:29:29
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