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yinchengmiao

铜虫 (初入文坛)

[求助] 土壤DNA提取,真菌通用引物PCR,琼脂糖电泳图,感觉有问题,新手求助

什么问题导致得出现此问题啊?
第一张图片琼脂糖浓度为1%,PCR反应体系,mix 25ul,上下游引物各2ul,模板为5ul,反应体系为50ul。反应条件:94预变性2min,94变性30秒,50退火30秒,72延伸1min15秒,36个循环,终延伸72,10min,电泳上样量为10ul,100bp Ladder 上样量为5ul.
第二张图片琼脂糖浓度为2%,PCR反应体系,mix 25ul,上下游引物各2ul,模板为10ul,反应体系为50ul。反应条件:94预变性2min,94变性30秒,50退火30秒,72延伸1min15秒,36个循环,终延伸72,10min,电泳上样量为20ul,100bp Ladder 上样量为10ul.为什么条带那样啊?新手求原因,望大家多多指教

上样量10ul



上样量20ul,出现两个亮条带的PCR加的模板量是出现一个两条带的两倍
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healerly

禁虫 (小有名气)

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6楼2012-06-18 15:59:35
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