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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 土壤DNA提取，真菌通用引物PCR，琼脂糖电泳图，感觉有问题，新手求助
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yinchengmiao

铜虫 (初入文坛)

[求助] 土壤DNA提取，真菌通用引物PCR，琼脂糖电泳图，感觉有问题，新手求助

什么问题导致得出现此问题啊？
第一张图片琼脂糖浓度为1%，PCR反应体系，mix 25ul，上下游引物各2ul，模板为5ul，反应体系为50ul。反应条件：94预变性2min，94变性30秒，50退火30秒，72延伸1min15秒，36个循环，终延伸72,10min，电泳上样量为10ul，100bp Ladder 上样量为5ul.
第二张图片琼脂糖浓度为2%，PCR反应体系，mix 25ul，上下游引物各2ul，模板为10ul，反应体系为50ul。反应条件：94预变性2min，94变性30秒，50退火30秒，72延伸1min15秒，36个循环，终延伸72,10min，电泳上样量为20ul，100bp Ladder 上样量为10ul.为什么条带那样啊？新手求原因，望大家多多指教

上样量10ul



上样量20ul，出现两个亮条带的PCR加的模板量是出现一个两条带的两倍
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1楼 2012-06-17 15:48:01
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uneei

金虫 (小有名气)
我还是第一次看到这种条带，等高人解答
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3楼2012-06-18 09:55:48
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查看全部 8 个回答

yinchengmiao

铜虫 (初入文坛)
用的100bp Ladder，分别为100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp、800bp、1000bp和1500bp
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2楼2012-06-18 09:23:51
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)
第一次看到这种图片，惊奇中
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4楼2012-06-18 13:41:13
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker和样品的条带一样奇怪，明显就是胶做的有问题吧。
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5楼2012-06-18 13:50:18
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