应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌ITS区PCR阴性有目的条带 产物却没条带
41/1返回列表
查看: 1551  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

金家女王

铁虫 (小有名气)

[求助] 真菌ITS区PCR阴性有目的条带 产物却没条带

对真菌进行rDNA-ITS区PCR，只有阴性有条带  还是目的条带
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-30 20:17:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maidmocha

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励应助 2011-12-31 03:54:42
这个问题真的很少出现。
阴性出结果，我想是因为污染的缘故吧。如果能够扩增出来，条带要比你这个阴性上的药亮得多。
PCR产物，你仔细想想你的体系。是不是忘记了加模板。或者是protocol不合适。把protocol发出来，更容易分析。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-12-31 00:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

金家女王

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by maidmocha at 2011-12-31 00:26:18:
这个问题真的很少出现。
阴性出结果，我想是因为污染的缘故吧。如果能够扩增出来，条带要比你这个阴性上的药亮得多。
PCR产物，你仔细想想你的体系。是不是忘记了加模板。或者是protocol不合适。把protocol发出 ...

模板是加了的  重复了很多遍  结果都一样  如果污染的话为什么加了模版的区域没有条带出现
体系：
10×buffer 2ul；
dNTP        0.8
ITS1         0.4
ITS4         0.4
Taq          1.2
ddH2O      15.2
模板       1

循环体系
94°  4min;94°  45s，58°  45s，72°  90s；72°  7min。  35C
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-31 11:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-01-01 10:44:39
金家女王(金币+3): ★有帮助 好吧 为了第一个帮助我的人。。。 2012-01-06 16:09:01
引用回帖:
3楼: Originally posted by 金家女王 at 2011-12-31 11:02:38:
模板是加了的  重复了很多遍  结果都一样  如果污染的话为什么加了模版的区域没有条带出现
体系：
10×buffer 2ul；
dNTP        0.8
ITS1         0.4
ITS4         0.4
Taq          1.2
ddH2O      15 ...

个人觉得Taq酶量加的太多了，一般0.5 ul就够了。
另对照出条带，个人建议把所有体系都换新的，包括引物重新合成，PCR管用一次性的，用的水去离子水灭菌分装或者买生物公司的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-01-01 07:43:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员GzwhL3 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 17/850 2026-11-13 17:38 by 寻迹天涯浪潮
[考博] 27博士 +5 锦鲤送福至 2026-11-10 5/250 2026-11-13 06:22 by wlf1982
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 04:21 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:14 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 4/200 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭