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liudianlei

银虫 (小有名气)

菌落pcr不是很严格,你可以把P出来的菌提个质粒,做酶切验证。
8楼2012-12-17 21:59:10
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普通回帖

追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不行,提个质粒,然后再用M13引物p一下看看,菌落pcr不是很准的啊,菌落上说不一定有杂质啊,
2楼2012-12-15 18:32:40
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
尽量少挑菌,然后优化一下退火温度,可以再提高试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-12-15 18:39:15
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rabitluan

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以提质粒酶切验证一下 菌落pcr  .不准的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-12-16 00:17:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌落PCR有时候有杂带是正常的,因为模板比较脏。感觉上是模板太多了。把有目的条带的菌落摇菌提下质粒再鉴定一下。
5楼2012-12-16 01:21:08
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none小妞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
挑菌的时候操作不规范,挑取单克隆。我认为lz一下沾了很多菌。所以条带杂了
6楼2012-12-17 09:55:09
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gdj363702043

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计引物的时候2聚体和三聚体  还存在呢  引物设计没设计好
加油努力
7楼2012-12-17 13:58:28
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海之子211

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这2个图除了引物一样,其他还有什么是一样,或者什么是不一样的
9楼2013-01-19 21:44:39
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gastrodia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

M13引物进行PCR时可以将退火温度提高到60度或65度,杂带就会减少了
10楼2013-01-19 21:46:36
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