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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落pcr的问题，大家给出个主意
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匿名

用户注销 (小有名气)
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1楼2012-12-15 18:03:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liudianlei

银虫 (小有名气)
菌落pcr不是很严格，你可以把P出来的菌提个质粒，做酶切验证。
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8楼2012-12-17 21:59:10
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普通回帖

追梦的人1987

金虫 (小有名气)

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感谢参与，应助指数 +1
不行，提个质粒，然后再用M13引物p一下看看，菌落pcr不是很准的啊，菌落上说不一定有杂质啊，
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2楼2012-12-15 18:32:40
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

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尽量少挑菌，然后优化一下退火温度，可以再提高试试。

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3楼2012-12-15 18:39:15
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rabitluan

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以提质粒酶切验证一下 菌落pcr  .不准的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-12-16 00:17:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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菌落PCR有时候有杂带是正常的，因为模板比较脏。感觉上是模板太多了。把有目的条带的菌落摇菌提下质粒再鉴定一下。
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5楼2012-12-16 01:21:08
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none小妞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑菌的时候操作不规范，挑取单克隆。我认为lz一下沾了很多菌。所以条带杂了
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6楼2012-12-17 09:55:09
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gdj363702043

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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设计引物的时候2聚体和三聚体  还存在呢  引物设计没设计好
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加油努力
7楼2012-12-17 13:58:28
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海之子211

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这2个图除了引物一样，其他还有什么是一样，或者什么是不一样的
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9楼2013-01-19 21:44:39
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gastrodia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

M13引物进行PCR时可以将退火温度提高到60度或65度，杂带就会减少了
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10楼2013-01-19 21:46:36
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