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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)

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[求助] PCR产物有条带，原液没有条带？（我不久前申请的号，没多少金币。大家行行好吧。）

最左边是maker ，然后是4个原液，然后4个分别是原液相对应的PCR产物。
1、PCR产物的第三条是亮的。但其原液没有？
2、在第6条maker的位置有一排很黑的。什么原因或什么物质？

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1楼2012-12-07 19:20:43

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三撇五撇

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助和交流 2012-12-09 21:57:59
左岸的雅各宾: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-12 11:51:51

1.那条黑带如上述是应该是凝胶成像仪拍照的问题造成的。
2.原液看不到的情况不代表没有，只要有，你的PCR过程也OK，那么就会扩增出来东西。但是你只有第三个PCR产物有亮带。是你的目的条带么？
第二个PCR产物下方是糊状的亮带，一般我会认为是模板和引物特异性不好改变退火温度试试。
其余两个什么都没有，会不会是PCR过程中忘记加什么了？
在点样时胶空漏也会是什么都没有的。
还有可以试试多加几ul 模板试试再不行就是模板得换了
遇到你的这种问题我会多家模板和改变温度重新扩如果不行那就是模板引物酶等的问题了