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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物有条带,原液没有条带?(我不久前申请的号,没多少金币。大家行行好吧。)

最左边是maker ,然后是4个原液,然后4个分别是原液相对应的PCR产物。
1、PCR产物的第三条是亮的。但其原液没有?
2、在第6条maker的位置有一排很黑的。什么原因或什么物质?

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
原液如果是指模板本来就应该看不见的。PCR的模板浓度很低,如果跑胶能看到模板的话说明PCR模板加多了。照片发黑的应该是溴酚蓝指示剂。
3楼2012-12-08 09:45:54
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
左岸的雅各宾: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-12 11:53:05
原液是模板?看不到不代表没有!那条黑带会不会是拍照时凝胶成像仪底板不干净引起的?挪动胶再照一张试试!如果是溴酚蓝应该每个泳道都有。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Dripping Concentrated!!energetic and active!
2楼2012-12-07 20:04:18
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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-08 09:45:54
原液如果是指模板本来就应该看不见的。PCR的模板浓度很低,如果跑胶能看到模板的话说明PCR模板加多了。照片发黑的应该是溴酚蓝指示剂。

原液是模板。我是先提出来,marker的左边四个就是的,每孔1ul的指示剂加5ul提取液。再用2ul的原液跑跑PCR,25体系的,再右边四个就是。正常情况下模板在第一条 maker上面一点,不知道这次为什么没有。
还有,指示剂按道理应该至少在最后一条marker那里啊。
4楼2012-12-08 13:43:40
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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hxswdl at 2012-12-07 20:04:18
原液是模板?看不到不代表没有!那条黑带会不会是拍照时凝胶成像仪底板不干净引起的?挪动胶再照一张试试!如果是溴酚蓝应该每个泳道都有。

原液是模板。我是先提出来,marker的左边四个就是的,每孔1ul的指示剂加5ul提取液。再用2ul的原液跑跑PCR,25体系的,再右边四个就是。正常情况下模板在第一条 maker上面一点,不知道这次为什么没有。
还有,指示剂按道理应该至少在最后一条marker那里啊。
5楼2012-12-08 13:43:51
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