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wa99999999

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌AGL-1 菌落PCR P不出来

构建好的载体 冻融法转化了农杆菌AGL-1,然后于加抗生素(K+,R+)的平板上培养2天,挑菌  摇菌   吸1ul做菌液PCR, 结果P不出来目的片断,做了几次也没P出来,
今早把菌液煮了7min,然后用液氮速冻,然后解冻,12000g离心,取上清液3ul做PCR,还是没P出来 快疯了,,请大虾门指点指点!

[ Last edited by wa99999999 on 2012-11-29 at 14:27 ]
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王zmm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你做菌落pcr的时候预变性有没有加长时间。提质粒酶切一下看看有没有转进去
2楼2012-12-15 16:35:10
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留学党

新虫 (小有名气)

3楼2018-12-27 20:53:24
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