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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 农杆菌AGL-1 菌落PCR P不出来
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wa99999999

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌AGL-1 菌落PCR P不出来

构建好的载体 冻融法转化了农杆菌AGL-1，然后于加抗生素（K+,R+)的平板上培养2天，挑菌  摇菌   吸1ul做菌液PCR， 结果P不出来目的片断，做了几次也没P出来，
今早把菌液煮了7min,然后用液氮速冻，然后解冻，12000g离心，取上清液3ul做PCR，还是没P出来 快疯了，，请大虾门指点指点！

[ Last edited by wa99999999 on 2012-11-29 at 14:27 ]
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1楼 2012-11-29 13:39:26
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王zmm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你做菌落pcr的时候预变性有没有加长时间。提质粒酶切一下看看有没有转进去
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2楼2012-12-15 16:35:10
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留学党

新虫 (小有名气)
同感，我也没做出来

发自小木虫Android客户端
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3楼2018-12-27 20:53:24
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