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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒转化与表达

最近做一批重组质粒,测序正确。打算转rosetta和bl21做表达,然而经过好几次的折腾,就是一个菌不长。排除了感受态,抗性,质粒质量及操作过程中的问题,可是依然没能解决问题。我想问一下还有哪些可能的因素影响质粒的转化。还有一个问题,我做了一个NusA做融合伴侣的重组质粒,转化表达质粒成功后不表达,没有移码,用IPTG 0.5mM诱导3h,无任何表达。请大侠们帮忙看看到底是哪里出现了问题。
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Francis_zw

铜虫 (初入文坛)

你用的是什么抗生素,菌体不断的质粒丢失,在抗生素的筛选下,菌体逐渐被杀死,故长不出来。
17楼2013-04-23 09:39:13
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