| 查看: 2909 | 回复: 9 | |||
_wuliao_木虫 (正式写手)
|
[求助]
质粒DNA转染遇到的一些问题 已有5人参与
|
| 本人是学化学专业的，现在交叉做点生物上的细胞转染实验，我用的是纳米材料转染PEGFP-C1质粒，用的是CHO细胞。我发现，每次用荧光显微镜看荧光的时候都能看到模模糊糊的，没办法聚焦的荧光，而且这个荧光也明显没有用lipsome 2000转染的量多，不知道这个荧光到底是哪来的？我的材料是没有荧光的，而且我用lipsome 2000转染过，荧光是非常强的，不知道我的实验遇到了什么问题。 |
回复此楼» 猜你喜欢
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有143人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 纳米粒连接质粒DNA
已经有7人回复
- 无机纳米连接质粒DNA
已经有3人回复
- 质粒共转染问题，瞬转。
已经有4人回复
- 心肌细胞转染质粒的选择：
已经有10人回复
- pEGFP-C1载体上连接目的基因，瞬时转染后48小时可以用WB直接检测几个蛋白表达量吗
已经有3人回复
- 如何实现质粒的稳定转染？
已经有8人回复
- 对质粒pSE380质粒了解的请进？
已经有5人回复
- 如何构建质粒以及提取它
已经有4人回复
- 怎样知道病毒的基因序列，例如乙肝病毒，或者大肠杆菌病毒
已经有4人回复
- 求助——质粒大提跑胶成这样
已经有26人回复
- 细胞瞬时转染和质粒复制
已经有23人回复
- RNA干扰实验是直接转染RNA还是转染表达该RNA的质粒？
已经有7人回复
- 质粒在细胞内能存在多久
已经有9人回复
- 大肠杆菌CaCl2法转染质粒DNA需要注意哪些方面？
已经有7人回复
- 细胞稳定转染，质粒的设计
已经有15人回复
- 逆转录病毒载体的质粒是否可用普通的方法做转染？？
已经有4人回复
- 质粒转染成功后质粒小提出现了问题
已经有4人回复
- 请大家看看这个eGFP真核载体，为什么转染Sp2/0后看不到荧光？
已经有5人回复
- miRNA质粒转染
已经有7人回复
- 【求助/交流】转染pNFκB-luc(报告基因质粒)需要共转染一个内参质粒的作用
已经有7人回复
- 【求助/交流】质粒经脂质体介导转染后的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达
已经有4人回复
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24338.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
2楼2014-07-25 14:08:13
_wuliao_
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4710.9
- 散金: 512
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 382
- 在线: 150小时
- 虫号: 1033739
- 注册: 2010-06-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
3楼2014-07-25 15:42:22
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-25 22:01:50
_wuliao_: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-07-28 09:22:32
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-25 22:01:50
_wuliao_: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-07-28 09:22:32
|
“荧光不一样”是怎么不一样？强度不一样？波段不一样？ GFP是绿色荧光，excitation/emission的波段是488nm/509nm。我不是太明白你观察的方式，如果用同样的滤镜可以看到的话，应该就是同一荧光了。荧光强度跟转染量/表达量有很大关系。有可能你的纳米材料转染效率本身就没有lipsome 2000那么高。 你可以转染之后用流式测定一下转染率。并且做一下对照组，同时用纳米材料转染别的质粒，最好是带有外源标记基因但是非荧光的。比如表达人类表面抗原之类。以确认你的转染不会产生自身荧光。 |
4楼2014-07-25 20:48:33
5楼2014-07-26 09:54:13
_wuliao_
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4710.9
- 散金: 512
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 382
- 在线: 150小时
- 虫号: 1033739
- 注册: 2010-06-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
6楼2014-07-28 09:29:18
7楼2014-07-28 19:00:00
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 911 (博后)
- 金币: 17574
- 散金: 1682
- 红花: 121
- 沙发: 42
- 帖子: 14626
- 在线: 2207.3小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
8楼2014-07-29 11:24:42
9楼2014-09-06 21:32:39
langzian
木虫 (正式写手)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2791.4
- 帖子: 341
- 在线: 132.4小时
- 虫号: 3151683
- 注册: 2014-04-18
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
10楼2014-09-09 14:29:47
