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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒DNA转染遇到的一些问题
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_wuliao_

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒DNA转染遇到的一些问题 已有5人参与

本人是学化学专业的，现在交叉做点生物上的细胞转染实验，我用的是纳米材料转染PEGFP-C1质粒，用的是CHO细胞。我发现，每次用荧光显微镜看荧光的时候都能看到模模糊糊的，没办法聚焦的荧光，而且这个荧光也明显没有用lipsome 2000转染的量多，不知道这个荧光到底是哪来的？我的材料是没有荧光的，而且我用lipsome 2000转染过，荧光是非常强的，不知道我的实验遇到了什么问题。
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1楼 2014-07-25 14:00:45
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_wuliao_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-07-25 14:08:13
不是很明白你问的问题，你的材料是没有 荧光，但你转染的治理pEGFP-C1是表达GFP的，在荧光显微镜下能看到绿色的荧光

我用纳米材料转染的目的就是想看下纳米材料到底能不能作为转染试剂。我困惑的地方就是我用lipsome 2000转染得到的荧光跟我用纳米材料转染得到的荧光是不一样的，lipsome 2000得到的荧光很强，而且很清晰。但是我用纳米材料得到的荧光很弱。我不知道用纳米材料得到的荧光是不是GFP的荧光。如果不是的话，那这个弱弱的荧光有可能是什么东西呢
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3楼2014-07-25 15:42:22
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_wuliao_

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by usky_4 at 2014-07-25 20:48:33
“荧光不一样”是怎么不一样？强度不一样？波段不一样？

GFP是绿色荧光，excitation/emission的波段是488nm/509nm。我不是太明白你观察的方式，如果用同样的滤镜可以看到的话，应该就是同一荧光了。荧光强度跟转 ...

我观察的时候用的是同样的滤镜。我的材料的转染效率应该是没有lipsome 2000那么高的，我用lipsome 2000转染生成GFP荧光是很强的，但是用纳米材料转染后的荧光很弱，我就是在疑惑我用纳米材料转染后看到的荧光会不会就不是GFP所产生的呢
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6楼2014-07-28 09:29:18
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