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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 蛋白表达对照组空菌和空质粒选择问题
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95846713

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白表达对照组空菌和空质粒选择问题 已有2人参与

1.我最近做蛋白表达，需要有诱导过的pet28a空质粒转入BL21中，这个对照直接用空质粒转化到BL21中，再涂板挑菌对吗？  
2.还有一个BL21空菌菌液怎么获得呢？直接用BL21倒入无抗生素LB液体培养基行吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-01-02 14:13:33
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-03 11:50:18
95846713: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-01-05 20:56:42
95846713: 金币+2 2015-01-05 20:57:17
1.对的，就是把pet28a载体质粒（不含外源基因片段）直接转入BL21感受态，再挑单克隆。这个需要加抗生素。
2.直接培养你的BL21感受态，不需加抗生素，一定不要污染了。
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2楼2015-01-03 10:51:42
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95846713

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2015-01-03 10:51:42
1.对的，就是把pet28a载体质粒（不含外源基因片段）直接转入BL21感受态，再挑单克隆。这个需要加抗生素。
2.直接培养你的BL21感受态，不需加抗生素，一定不要污染了。

直接培养你的BL21感受态，不需加抗生素 什么意思啊？ 是直接用BL21倒入无抗生素LB液体培养基摇菌吗？
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3楼2015-01-03 13:30:42
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这两个对照都没有实质性的必要。因为带有融合基因的载体只有在诱导时才会表达，所以可以进行自身对照。不知道你设这两个对照作何目的？
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4楼2015-01-03 14:31:23
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 95846713 at 2015-01-03 13:30:42
直接培养你的BL21感受态，不需加抗生素 什么意思啊？ 是直接用BL21倒入无抗生素LB液体培养基摇菌吗？...

最好还是把BL21感受态划线，挑单克隆。再扩大培养，怕污染。

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2015-01-04 09:18:14
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