24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3682  |  回复: 14

bio.shk

铁杆木虫 (正式写手)

真相只有一个

[交流] Co-ip:两种过表达质粒共转同一株细胞里,检测两个蛋白的相互作用 已有1人参与

求助:
1. 两种质粒的量怎么加?是1:1吗?
2. 怎么加质粒?是同时加进去,还是先转进去一个稳定之后再转另一个?
3. 需要细胞量是多少?

谢谢!!!
回复此楼
奇迹源于自信,脚踏实地!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)


bio.shk: 金币+1, 谢谢 灰常感谢 2015-01-08 08:57:14
路过的看了一下,帮顶~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
2楼2015-01-08 08:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肚糠稀同学

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bio.shk: 金币+1, 谢谢 2015-01-08 10:22:16
小的不做这方面的  也不懂   帮顶呗!
3楼2015-01-08 10:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翼在天

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bio.shk: 金币+1 2015-01-09 11:51:09
你好,我不知道你这个质粒怎么转,只是想问一下,在这个实验设计的时候有考虑过质粒的不相容性吗?两个质粒同时转入一个细胞的时候会有这种问题。
4楼2015-01-08 13:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)


bio.shk: 金币+1 2015-01-09 11:51:12
blessing
5楼2015-01-08 13:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuguozhen1115

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bio.shk(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-08 20:50:58
bio.shk: 金币+2, 谢谢 回复的很详细 2015-01-09 11:50:28
一般两种一起加进去比较省事,实验周期短。两种的比例,要根据具体情况分析,如果没有其他信息辅助,那就1:1加。转的方法很多,脂质体类的转染试剂比较常用,电转,或者其他转染的方法都可以尝试。
细胞的用量,取决于你特定蛋白的表达量,Co-iP也不大熟,看看别人的回答吧
6楼2015-01-08 16:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio.shk

铁杆木虫 (正式写手)

真相只有一个

引用回帖:
4楼: Originally posted by 翼在天 at 2015-01-08 13:11:21
你好,我不知道你这个质粒怎么转,只是想问一下,在这个实验设计的时候有考虑过质粒的不相容性吗?两个质粒同时转入一个细胞的时候会有这种问题。

怎么判断它们有没有相容性呢?
奇迹源于自信,脚踏实地!
7楼2015-01-09 11:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio.shk

铁杆木虫 (正式写手)

真相只有一个

引用回帖:
5楼: Originally posted by mzhyan at 2015-01-08 13:41:22
blessing

thks
奇迹源于自信,脚踏实地!
8楼2015-01-09 12:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翼在天

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by bio.shk at 2015-01-09 11:51:38
怎么判断它们有没有相容性呢?...

一般来讲,携带相同复制子的不同质粒不共存于同一细菌中,带有不可互换成分的复制子的质粒则可以共存于同一细菌中。
9楼2015-01-09 14:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junior850621

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
bio.shk(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-10 20:04:14
bio.shk: 金币+8, 嗯 回复的很详细 谢谢 2015-01-11 19:29:54
1:可以1:1加;之后视情况调整。
2:都可以,稳赚后的效果更明显(但假阳性可能也更高)。推荐先做瞬转再看情况,一般瞬转就可以了。
3:我一般用60mm dish,足够。不放心可以多做一点,我第一次100mm做的。之后都60mm。
另:不相容性主要在原核细胞中需要考虑。瞬转到真核没必要考虑。
10楼2015-01-09 23:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bio.shk 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +7 刘墨墨 2026-04-13 7/350 2026-04-13 17:23 by ss592599143
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +9 李木子啊哈哈 2026-04-12 10/500 2026-04-13 08:45 by Sammy2
[考研] 求调剂288 +7 ioodiiij 2026-04-10 9/450 2026-04-13 08:33 by Hayaay
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +7 Ytyt11 2026-04-09 8/400 2026-04-12 16:57 by ajpv风雷
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +11 月@163.com 2026-04-07 13/650 2026-04-11 22:55 by BruceLiu320
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 初试分332,一志愿报考西北工业大学, +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
信息提示
请填处理意见