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2008116068

木虫 (著名写手)

[求助] 如何让质粒表达--启动子?

有劳各位大侠思考:
          实验室分到一株多粘芽孢杆菌,用fosmid质粒建库后,我拿到一个抗生素基因簇33K,现在我想要这个基因簇在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌内表达,该如何操作?

我曾将这个质粒导入大肠杆菌和枯草168中,均布表达无效果,估计是没有表达(用软件预测,前端有启动子)。
现在想,这么大一个质粒能在宿主表达吗?

如果可以表达,是需要分别换成什么样的启动子呢?

各位大侠可以大胆的说一下你们的想法,O(∩_∩)O谢谢
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只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-17 17:15:02
楼主 我也做生防细菌的抗生素基因 想问下楼主用什么方法找到的基因 我用的是突变的方法找突变位点
2楼2011-11-17 15:48:02
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2008116068

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-17 15:48:02:
楼主 我也做生防细菌的抗生素基因 想问下楼主用什么方法找到的基因 我用的是突变的方法找突变位点

southern
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
3楼2011-11-18 09:20:55
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-19 14:25:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2008116068 at 2011-11-18 09:20:55:
southern

southern我在实验中期用 想知道下楼主前期是怎样明确这个片段就是你的目的片段?用突变体?同源克隆?还是别的方法?
4楼2011-11-18 18:38:13
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2008116068

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-18 18:38:13:
southern我在实验中期用 想知道下楼主前期是怎样明确这个片段就是你的目的片段?用突变体?同源克隆?还是别的方法?

我们是全基因组测序,根据已经报道的基因
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
5楼2011-11-18 23:26:13
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 2008116068 at 2011-11-18 23:26:13:
我们是全基因组测序,根据已经报道的基因

这样啊 能否将相关文献发我看下 我想找其他属菌的抗生素基因 多谢!shuangzi8761@sina.com
6楼2011-11-19 20:17:35
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