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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何让质粒表达--启动子？
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2008116068

木虫 (著名写手)

[求助] 如何让质粒表达--启动子？

有劳各位大侠思考：
          实验室分到一株多粘芽孢杆菌，用fosmid质粒建库后，我拿到一个抗生素基因簇33K，现在我想要这个基因簇在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌内表达，该如何操作？

我曾将这个质粒导入大肠杆菌和枯草168中，均布表达无效果，估计是没有表达（用软件预测，前端有启动子）。
现在想，这么大一个质粒能在宿主表达吗？

如果可以表达，是需要分别换成什么样的启动子呢？

各位大侠可以大胆的说一下你们的想法，O(∩_∩)O谢谢
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只要踮起脚尖，就离太阳更近一点！！！
1楼 2011-11-15 19:00:24
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2008116068

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-17 15:48:02:
楼主 我也做生防细菌的抗生素基因 想问下楼主用什么方法找到的基因 我用的是突变的方法找突变位点

southern
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只要踮起脚尖，就离太阳更近一点！！！
3楼2011-11-18 09:20:55
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-17 17:15:02
楼主 我也做生防细菌的抗生素基因 想问下楼主用什么方法找到的基因 我用的是突变的方法找突变位点
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2楼2011-11-17 15:48:02
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-19 14:25:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by 2008116068 at 2011-11-18 09:20:55:
southern

southern我在实验中期用 想知道下楼主前期是怎样明确这个片段就是你的目的片段？用突变体？同源克隆？还是别的方法？
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4楼2011-11-18 18:38:13
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2008116068

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shuangzi8761 at 2011-11-18 18:38:13:
southern我在实验中期用 想知道下楼主前期是怎样明确这个片段就是你的目的片段？用突变体？同源克隆？还是别的方法？

我们是全基因组测序，根据已经报道的基因
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只要踮起脚尖，就离太阳更近一点！！！
5楼2011-11-18 23:26:13
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