应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 为什么先使用Trans1-T1转化连接产物，再提取质粒转化到表达细胞里面？
51/1返回列表
查看: 2437  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qinglongwang

新虫 (小有名气)

[求助] 为什么先使用Trans1-T1转化连接产物，再提取质粒转化到表达细胞里面？ 已有2人参与

用全式金载体pEasy-E2转化到大肠杆菌表达，为什么需要先使用Trans1-T1转化连接产物，再提取质粒转化到表达细胞里面？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-23 19:21:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
相较于表达细胞，外源序列更易转入Trans1，通过Trans1获得大量重组载体，再转化表达细胞，这样就更容易获得重组表达菌。这和构建植物表达载体时，先转化大肠杆菌，获得阳性菌提取质粒后再转化农杆菌是一样的道理。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

qinglongwang
2楼2014-07-23 22:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinglongwang

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2014-07-23 22:16:53
相较于表达细胞，外源序列更易转入Trans1，通过Trans1获得大量重组载体，再转化表达细胞，这样就更容易获得重组表达菌。这和构建植物表达载体时，先转化大肠杆菌，获得阳性菌提取质粒后再转化农杆菌是一样的道理。

谢谢。

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2014-07-23 22:47:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大肠杆菌菌株可分为克隆菌株和表达菌株，Trans1-T1就是一个克隆菌株，用来扩增质粒，一般克隆菌株中endA1和RecA1酶都是敲除的，这样使得外源质粒适于在细菌体内复制，而且没有endA1，提出来的质粒不易被降解
你说的表达细胞应该是表达菌株吧，常见的就是BL21，用来表达目的蛋白，BL21的endA1没有敲除，所以不适合从其中提取质粒
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-07-25 14:50:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinglongwang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2014-07-25 14:50:04
大肠杆菌菌株可分为克隆菌株和表达菌株，Trans1-T1就是一个克隆菌株，用来扩增质粒，一般克隆菌株中endA1和RecA1酶都是敲除的，这样使得外源质粒适于在细菌体内复制，而且没有endA1，提出来的质粒不易被降解
你说的 ...

嗯嗯，谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
5楼2014-07-25 16:45:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qinglongwang 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 20:38 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 6/300 2026-11-08 19:43 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭