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qinglongwang

新虫 (小有名气)

[求助] 为什么先使用Trans1-T1转化连接产物,再提取质粒转化到表达细胞里面?已有2人参与

用全式金载体pEasy-E2转化到大肠杆菌表达,为什么需要先使用Trans1-T1转化连接产物,再提取质粒转化到表达细胞里面?
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gyesang

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【答案】应助回帖

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大肠杆菌菌株可分为克隆菌株和表达菌株,Trans1-T1就是一个克隆菌株,用来扩增质粒,一般克隆菌株中endA1和RecA1酶都是敲除的,这样使得外源质粒适于在细菌体内复制,而且没有endA1,提出来的质粒不易被降解
你说的表达细胞应该是表达菌株吧,常见的就是BL21,用来表达目的蛋白,BL21的endA1没有敲除,所以不适合从其中提取质粒
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-07-25 14:50:04
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