| 查看: 2710 | 回复: 11 | |||
zxd95至尊木虫 (著名写手)
|
[交流]
【求助/交流】蛋白质纯化的疑难问题 已有10人参与
|
|
年前就做蛋白纯化，该蛋白使用pET-32a表达，分子量约34kDa，表达菌为Rosetta(DE3),因为宿主菌本身在35kDa左右就有表达； 使用HisTrap 1ml镍柱纯化后发现，目标蛋白和宿主菌35kDa左右蛋白均挂柱，我是使用说明书推荐的Buffer(20mM磷酸缓冲液 + 0.5M NaCl + 30、60、100、150、200、250、300、500mM咪唑，pH7.4)梯度洗脱的，发现在100和150mM咪唑下，目标蛋白和35kDa杂蛋白均洗脱。 割胶回收也做不出来，郁闷中！！！！！！！！！！  请虫友们指导！ 谢谢！  [ Last edited by zxd95 on 2011-3-28 at 12:15 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有297人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质纯化中硫酸铵沉淀后沉淀溶解的问题
已经有11人回复
- 蛋白纯化Ni-IDA柱子出现问题
已经有20人回复
- 纯化蛋白时关于溶液中咪唑的问题
已经有7人回复
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- 纯化蛋白质时，用Miracloth过滤
已经有5人回复
- Q-Sepharose Fast Flow 纯化蛋白遇到的棘手问题
已经有11人回复
- 求助各位大神关于含组氨酸标签蛋白纯化的问题
已经有8人回复
- 蛋白质除盐纯化的问题
已经有14人回复
- 关于蛋白质纯化柱子的问题
已经有9人回复
- 带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
已经有20人回复
- 95KD蛋白纯化求助！！！！！！！！
已经有7人回复
- 求教离子交换柱纯化蛋白的问题
已经有28人回复
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- 蛋白纯化镍柱、分子筛
已经有9人回复
- AMPK蛋白纯化问题讨论
已经有21人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- 进行羟胺裂解后，进行蛋白的二次过亲和层析住纯化问题！！！！求助啊 ！！！
已经有9人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
- 关于蛋白纯化的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化中透析的问题！！
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于分子筛纯化蛋白的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化后透析及浓缩问题
已经有8人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- MolEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113379
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28941
- 在线: 3683小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
2楼2011-03-14 11:23:24
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
3楼2011-03-14 11:59:01
chenshuai1238
金虫 (初入文坛)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1368.8
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 45
- 在线: 27.2小时
- 虫号: 594554
- 注册: 2008-09-06
- 专业: 影像医学与生物医学工程其
4楼2011-03-14 16:32:27
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- MolEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113379
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28941
- 在线: 3683小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
5楼2011-03-14 16:55:50
6楼2011-03-28 22:26:28
xuyihui2001
银虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 594.7
- 散金: 17
- 红花: 2
- 帖子: 369
- 在线: 79.1小时
- 虫号: 1077344
- 注册: 2010-08-19
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2011-03-29 12:41:18
8楼2012-02-14 17:09:49
ixido
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 33 (小学生)
- 金币: 2066.4
- 红花: 6
- 帖子: 206
- 在线: 70.4小时
- 虫号: 998373
- 注册: 2010-04-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
9楼2012-02-14 17:20:45
sdxianwei
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2156.3
- 帖子: 187
- 在线: 19.5小时
- 虫号: 718477
- 注册: 2009-03-09
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
10楼2012-03-16 13:00:14
