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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】克隆pcr 有图 求真相
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天际雾影

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】克隆pcr 有图 求真相

PCR 第一道（左）是一个没有加模板的对照组，但结果和其他加了模板的一样有条带。目标片段270bp 。这是为啥啊？求助大家！
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1楼 2010-12-24 23:09:38
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
天际雾影(金币+1): 2010-12-24 23:47:45
dhd997(金币+2):good 2010-12-25 09:02:44
有模板DNA污染了。。。
有可能是你的移液枪带进去的。。。

重做，所有的东西换新的
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2楼2010-12-24 23:11:31
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 09:02:53
不知道你扩的是什么片段，莫非引物是很通用的？类似16S部分序列？
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3楼2010-12-24 23:30:54
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天际雾影

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-24 23:30:54:
不知道你扩的是什么片段，莫非引物是很通用的？类似16S部分序列？

这是特异的。但我没加模板啊!
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4楼2010-12-24 23:45:32
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天际雾影

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by scelab at 2010-12-24 23:11:31:
有模板DNA污染了。。。
有可能是你的移液枪带进去的。。。

重做，所有的东西换新的

谢谢提醒。
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5楼2010-12-24 23:48:22
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by 天际雾影 at 2010-12-24 23:45:32:

这是特异的。但我没加模板啊!

重复做一次，不行就换个人帮你做。
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6楼2010-12-24 23:53:23
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天际雾影 at 2010-12-24 23:09:38:
PCR 第一道（左）是一个没有加模板的对照组，但结果和其他加了模板的一样有条带。目标片段270bp 。这是为啥啊？求助大家！

呵呵，很显然，水，buffer或者酶等成分有模板污染了。
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7楼2010-12-25 09:42:06
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
注意换枪头！
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8楼2010-12-25 09:42:38
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